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O sequenciamento de DNA é uma ferramenta de biologia molecular para determinar a sequência (ordem) das bases nitrogenadas (A, T, C e G) num fragmento de DNA.
Sabendo essa ordem, é possível conhecer os genes, regiões reguladoras, RNAs, proteínas de um organismo, além de a sequência poder ser comparada com outras semelhantes, o que fornece dados importantes para o conhecimento científico.
Atualmente, com os equipamentos e materiais adequados, sequenciar um trecho de DNA é relativamente fácil.
Aplicações
O sequenciamento de DNA pode ser usado para determinar a sequência de genes individuais, regiões genéticas maiores, cromossomos inteiros e até mesmo genomas completos de qualquer organismo.Quando falamos em sequenciamento de um genoma completo, a tarefa continua sendo complexa.
Para isso, é preciso quebrar o DNA do genoma em trechos menores e então juntar esses trechos em uma única longa fita consenso.
Existem alguns tipos de métodos para sequenciar o DNA, como por exemplo o Sequenciamento de Sanger e o Sequenciamento de Alto Rendimento (HTS, do inglês High-throughput sequencing).
Sequenciamento de Sanger
Também chamado de método de terminação de cadeia, foi desenvolvido por Frederick Sanger e colaboradores em 1977, tornando-se rapidamente o método de escolha para sequenciar DNA.Detalhes dessa técnica estarão em breve disponíveis em um post específico.
Sequenciamento de Alto Rendimento
Dentre esse tipo de sequenciamento estão o sequenciamento de nova geração (NGS, do inglês next-generation sequencing) e o sequenciamento de terceira geração.Essas técnicas são aplicadas no sequenciamento do exoma, do genoma, de RNA (transcriptoma), epigenoma entre outras.
Análise dos resultados
Determinar a ordem em que os nucleotídeos estão localizados numa sequência de DNA é uma parte importante, mas não é tudo.Após os resultados, é necessário analisar as sequências para obter informações úteis sobre o DNA.
Essas análises são realizadas principalmente por técnicas de bioinformática.
Referências
Sigma Aldrich. Sanger Sequencing Steps and Method.Khan Academy. DNA Sequencing.
Illumina. DNA Sequencing - Understanding the genetic code.