O Great Place to Work (GPTW) divulgou o ranking das 175 Melhores Empresas Para Trabalhar no Brasil em 2026. 

Entre as organizações premiadas estão hospitais, laboratórios de análises clínicas, operadoras de saúde e empresas das indústrias farmacêutica e de diagnóstico.

A classificação é dividida em três categorias, conforme o número de funcionários: empresas com 100 a 999 colaboradores, de 1.000 a 9.999 e com 10.000 ou mais.

Melhores empresas da área da saúde em 2026

A seguir, estão as empresas relacionadas à saúde humana, ao diagnóstico e à indústria farmacêutica que se destacaram no ranking nacional de 2026.

O que esse ranking significa para os biomédicos?

A presença de laboratórios, hospitais e empresas farmacêuticas entre as organizações premiadas mostra que existem diferentes possibilidades de carreira para biomédicos além da rotina tradicional de análises clínicas.

Empresas como Laboratório Sabin, Siemens Healthineers e Hospital Albert Einstein possuem atividades relacionadas ao diagnóstico laboratorial e às tecnologias em saúde. 

Já organizações como Novo Nordisk, AstraZeneca e Eurofarma atuam em áreas que podem envolver pesquisa, desenvolvimento, controle da qualidade e produção farmacêutica.

Mas, estar entre as melhores empresas para trabalhar não significa necessariamente oferecer os maiores salários ou as melhores oportunidades específicas para biomédicos.

O que o GPTW avalia?

O Great Place to Work é uma organização que avalia a experiência dos funcionários e a qualidade do ambiente de trabalho nas empresas.

Uma das principais ferramentas utilizadas é a pesquisa Trust Index, respondida de forma confidencial pelos próprios colaboradores. A avaliação considera cinco dimensões:

1. Credibilidade: confiança na liderança, comunicação e transparência.
2. Respeito: valorização dos funcionários, apoio profissional e condições de trabalho.
3. Imparcialidade: tratamento justo, igualdade de oportunidades e ausência de favoritismo.
4. Orgulho: satisfação em trabalhar na organização e reconhecimento da importância das atividades realizadas.
5. Camaradagem: qualidade das relações entre colegas, colaboração e sentimento de pertencimento.

A pesquisa contém 60 afirmativas sobre a experiência dos colaboradores. 

Para empresas com 100 ou mais funcionários, a metodologia geral dos rankings também considera as práticas organizacionais avaliadas pelo GPTW, além das respostas dos trabalhadores.

Portanto, o ranking não é elaborado apenas com base em salários ou benefícios, mas principalmente na percepção dos funcionários sobre o ambiente de trabalho.

Referências

GREAT PLACE TO WORK BRASIL. 175 Melhores Empresas Para Trabalhar no Brasil em 2026. Disponível em: https://conteudo.gptw.com.br/melhores-empresas-para-trabalhar.

GREAT PLACE TO WORK BRASIL. Trust Index GPTW: o que é, como funciona e como interpretar o resultado. 2026. Disponível em: https://gptw.com.br/conteudo/artigos/trust-index-gptw/.

A Resolução nº 433 do Conselho Federal estabelece os valores das anuidades, taxas e emolumentos devidos aos Conselhos Regionais para o ano de 2027.

O valor da anuidade para biomédicos (pessoa física) será de R$ 655,00, com vencimento em 31 de março de 2027, para pagamento em parcela única sem desconto.

Para tecnólogos da área da saúde, a anuidade será de R$ 324,00, enquanto os técnicos da área da saúde pagarão R$ 191,00.

O valor da anuidade para pessoa jurídica depende do capital social registrado, variando de R$ 690,00 a R$ 3.106,00.

Pagamento da anuidade do CRBM em 2027

Há várias opções de pagamento:

• Até 29/01/2027, em parcela única, com desconto de 10%, totalizando R$ 589,50;
• Até 26/02/2027, em parcela única, com desconto de 5%, totalizando R$ 622,25;
• Até 31/03/2027, em parcela única, sem desconto, no valor de R$ 655,00.

A anuidade também poderá ser quitada em até 6 parcelas mensais, iguais e consecutivas, sem desconto, com vencimentos em 29/01, 26/02, 31/03, 30/04, 31/05 e 30/06/2027.

A nova resolução também permite que os Conselhos Regionais ofereçam, a seu critério, um parcelamento extraordinário em até 12 vezes.

E teve aumento

Em 2026, o valor da anuidade dos biomédicos foi de R$ 630,00. 

Em 2027, passará para R$ 655,00, representando um aumento de R$ 25,00, aproximadamente 3,97%.

Segundo o CFBM, o reajuste considerou a variação acumulada do INPC entre setembro de 2025 e agosto de 2026, de 3,9833%, adotando como referência o percentual de 4%.

Confira no gráfico abaixo a evolução dos valores das anuidades dos biomédicos, de 2008 até 2027.

O gráfico mostra que a anuidade dos biomédicos passou de R$ 295,98, em 2008, para R$ 655,00, em 2027, representando um aumento nominal acumulado de aproximadamente 121,3%. 

Em valores absolutos, a anuidade aumentou R$ 359,02 entre 2008 e 2027, com crescimento médio composto de aproximadamente 4,3% ao ano.

Ao longo desse período, os reajustes não ocorreram de maneira uniforme, destacando-se a estabilidade dos valores entre 2020 e 2022 e a retomada dos aumentos anuais a partir de 2023.

Outras novidades para 2027

A resolução também estabelece desconto de 50% na anuidade de inscrições suplementares mantidas em outro Conselho Regional, mediante apresentação anual da documentação de regularidade exigida.

Para pessoas jurídicas, filiais, unidades secundárias e postos de coleta vinculados a laboratórios poderão pagar 50% do valor da anuidade da matriz, desde que atendidas as condições previstas na resolução.

Em caso de atraso, será aplicada multa de 0,33% ao dia, limitada a 20%, além de juros calculados com base na taxa Selic.

A Resolução nº 433/2026 entra em vigor em 1º de janeiro de 2027, quando substituirá a Resolução nº 402/2025.

Referência

CONSELHO FEDERAL DE BIOMEDICINA. Resolução CFBM nº 433, de 9 de outubro de 2026. Diário Oficial da União, Brasília, DF, 13 out. 2026, seção 1, p. 180. Disponível em: https://cfbm.gov.br/wp-content/uploads/2026/10/13-10-26-DOU-CFBM-ATO-RES-433.pdf.

Um exame laboratorial é muito mais do que apenas identificar uma substância numa amostra biológica ou produzir um resultado numérico. 

Para ser utilizado na prática, ele precisa ter:

• Desempenho analítico adequado
• Evidências científicas que sustentem sua aplicação clínica
• Condições seguras de execução

Isso significa que nem toda substância que pode ser medida ou detectada em uma amostra biológica representa, necessariamente, um marcador útil para diagnóstico, prognóstico ou acompanhamento de doenças.

A avaliação de um exame envolve três conceitos fundamentais: 

• Validade analítica
• Validade clínica
• Utilidade clínica

O que define um exame laboratorial

De acordo com a RDC Anvisa nº 978/2025, um Exame de Análises Clínicas (EAC) é um processo operacional composto pelas fases pré-analítica, analítica e pós-analítica.

O objetivo é determinar valores ou características de uma amostra biológica.

Esse conceito se aplica a diferentes áreas, como bioquímica, hematologia, microbiologia, imunologia, genética, biologia molecular e outras especialidades laboratoriais.

Os exames podem apresentar resultados quantitativos, qualitativos ou semiquantitativos e ser utilizados para diferentes finalidades, incluindo:

• Triagem
• Diagnóstico
• Prognóstico
• Estadiamento
• Monitoramento
• Resposta ao tratamento

Mas, a finalidade desse exame deve estar clara, pois seu resultado pode ter significados diferentes dependendo do grupo de pacientes e da doença.

Por exemplo, um marcador tumoral que é utilizado para a triagem mas não para fechar o diagnóstico.

Validade analítica

O exame mede corretamente?

A validade analítica corresponde à capacidade de um método detectar ou medir o analito de interesse com desempenho adequado.

Para demonstrar esse desempenho, diferentes parâmetros podem ser avaliados, dependendo da natureza do exame:

Essas características precisam atender a critérios de desempenho previamente estabelecidos, considerando a finalidade clínica do exame.

A boa notícia é que se for um exame comercial (com bula/instruções de uso) a empresa fabricante já fez todo esse trabalho de validação. 

O nosso papel é somente verificar se o que consta na bula realmente se reproduz no nosso laboratório.

Mas, atenção! Na hora de executar o teste a gente tem que seguir tudo como está escrito lá, pois qualquer adaptação feita pode afetar o resultado.

E ainda, um método pode medir uma substância com excelente precisão e, ainda assim, não apresentar utilidade clínica comprovada.

Validade clínica

O resultado está associado à condição investigada?

A validade clínica corresponde à capacidade de um exame identificar, classificar ou prever adequadamente uma condição clínica de interesse.

Nesse contexto, não basta demonstrar que um analito pode ser medido. 

É necessário estabelecer uma relação cientificamente fundamentada entre o resultado e a condição investigada.

Nos testes diagnósticos, duas características são especialmente importantes:

• Sensibilidade diagnóstica: proporção de indivíduos com a condição investigada que apresentam resultado positivo.
• Especificidade diagnóstica: proporção de indivíduos sem a condição investigada que apresentam resultado negativo.

Outras medidas, como valores preditivos e razões de verossimilhança, também contribuem para a interpretação do desempenho clínico.

Por exemplo, determinado biomarcador pode apresentar concentrações elevadas em pacientes com uma doença, mas também aumentar em diversas outras condições. 

Nesse caso, apesar de existir associação biológica, sua capacidade de diferenciar indivíduos com e sem a doença pode ser limitada.

Sendo assim, um exame validado para determinada aplicação não está automaticamente validado para todas as situações clínicas.

Utilidade clínica

O exame realmente contribui para a assistência ao paciente?

A utilidade clínica representa o benefício que a utilização de um exame pode proporcionar à tomada de decisão e aos resultados da assistência à saúde.

Um teste pode apresentar boa validade analítica e clínica, mas acrescentar pouca informação relevante aos exames já disponíveis.

Para avaliar sua utilidade, algumas perguntas são fundamentais:

• O resultado pode modificar uma decisão clínica?
• O exame permite identificar uma condição que não seria detectada adequadamente pelos métodos existentes?
• Sua utilização pode contribuir para melhorar o diagnóstico, o tratamento ou o acompanhamento do paciente?
• Os benefícios esperados justificam os custos e os possíveis riscos de sua utilização?

A utilidade clínica deve considerar o impacto dos resultados nas decisões assistenciais, nos desfechos dos pacientes e na utilização dos recursos de saúde.

Um exemplo é a introdução de um novo biomarcador para diagnóstico precoce. 

Mesmo que ele apresente elevada sensibilidade, sua incorporação à rotina deve considerar se a identificação antecipada da doença permite alguma intervenção clinicamente relevante.

Assim, a utilidade de um exame não depende apenas de sua capacidade de detectar alterações, mas também do valor das informações obtidas para o cuidado do paciente.

Um exame pode ser tecnicamente confiável e clinicamente inadequado?

Sim.

Imagine um biomarcador que apresenta excelente precisão e baixa variabilidade entre medições. 

Essas características demonstram um bom desempenho analítico.

Mas, se esse biomarcador não consegue diferenciar adequadamente pacientes com e sem determinada doença, sua validade clínica para essa finalidade será limitada.

Da mesma forma, um exame pode apresentar bom desempenho diagnóstico, mas não modificar as decisões assistenciais em relação aos métodos já utilizados.

Essas situações demonstram que confiabilidade analítica, desempenho clínico e utilidade clínica são requisitos complementares.

Por causa de todas essas variáveis que até hoje a dosagem de cistatina C sérica não substituiu a dosagem de creatinina sérica, por exemplo.

Referências

BRASIL. Agência Nacional de Vigilância Sanitária. Resolução RDC nº 978, de 6 de junho de 2025. Dispõe sobre o funcionamento de serviços que executam as atividades relacionadas aos Exames de Análises Clínicas (EAC). Brasília: Anvisa, 2025.

INTERNATIONAL ORGANIZATION FOR STANDARDIZATION. ISO 15189:2022: Medical laboratories: requirements for quality and competence. Geneva: ISO, 2022. Disponível em: https://www.iso.org/standard/15189.

CLINICAL AND LABORATORY STANDARDS INSTITUTE. EP19: A framework for using CLSI documents to evaluate medical laboratory test methods. 3. ed. Malvern: CLSI, 2022. Disponível em: https://clsi.org/shop/standards/ep19/.

LORD, S. J. et al. Is this test fit-for-purpose? Principles and a checklist for evaluating the clinical performance of a test in the new era of in vitro diagnostic (IVD) regulation. Critical Reviews in Clinical Laboratory Sciences, v. 62, n. 3, p. 182-197, 2025. DOI: https://doi.org/10.1080/10408363.2025.2453148.

BADRICK, Tony; BOWLING, Francis. Clinical utility: information about the usefulness of tests. Clinical Biochemistry, v. 121-122, art. 110656, 2023. DOI: https://doi.org/10.1016/j.clinbiochem.2023.110656.

A contagem de reticulócitos é um dos principais exames utilizados para avaliar a atividade eritropoiética da medula óssea. 

Além de auxiliar na investigação das anemias, a análise automatizada permite obter parâmetros adicionais que fornecem informações sobre a maturação dos reticulócitos e seu conteúdo de hemoglobina.

Mas, apesar dos avanços nas tecnologias, ainda existem diferenças importantes entre os resultados produzidos pelos analisadores hematológicos, especialmente nos parâmetros derivados.

Um estudo conduzido por um grupo de trabalho do International Council for Standardization in Haematology (ICSH), publicado em 2024, investigou a comparabilidade dos resultados de reticulócitos entre diferentes sistemas analíticos e identificou desafios que ainda precisam ser superados para alcançar sua padronização.

O que são reticulócitos

Os reticulócitos são eritrócitos jovens que ainda apresentam material ribossômico residual. 

Sua quantificação permite avaliar a resposta eritropoiética, sendo particularmente útil na investigação de pacientes com anemia.

A contagem de reticulócitos auxilia na diferenciação de condições associadas à redução da produção de eritrócitos, como as anemias hipoproliferativas, daquelas relacionadas ao aumento da destruição ou perda sanguínea, como as anemias hemolíticas e as hemorragias.

Tradicionalmente, a contagem é realizada manualmente, utilizando colorações supravitais para evidenciar o material reticular presente nessas células.

Coloração de reticulócitos com azul de cresil brilhante

Com o desenvolvimento dos analisadores hematológicos automatizados, passaram a ser utilizadas metodologias mais sensíveis, incluindo corantes específicos para ácidos nucleicos, fluorescência, dispersão de luz e citometria de fluxo.

Essas tecnologias melhoraram a precisão analítica, aumentaram a eficiência dos laboratórios e permitiram desenvolver novos parâmetros relacionados à biologia dos reticulócitos.

Parâmetros derivados

Além da contagem percentual e absoluta, os analisadores hematológicos modernos podem fornecer índices relacionados à maturidade celular e ao conteúdo de hemoglobina dos reticulócitos.

A contagem percentual expressa a proporção de reticulócitos em relação ao total de eritrócitos analisados.

No estudo do ICSH, esse foi o parâmetro que apresentou a melhor comparabilidade entre diferentes sistemas analíticos.

A contagem absoluta representa a quantidade de reticulócitos por unidade de volume sanguíneo.

Diferentemente da contagem percentual, esse resultado é calculado a partir de dois parâmetros: a porcentagem de reticulócitos e a contagem total de eritrócitos.

Contagem absoluta de reticulócitos = RET% × contagem de eritrócitos

Fração de reticulócitos imaturos (IRF)

A Immature Reticulocyte Fraction (IRF), ou fração de reticulócitos imaturos, é um parâmetro relacionado ao grau de maturação dos reticulócitos circulantes.

Nos analisadores automatizados, os reticulócitos são classificados em subpopulações conforme seu grau de maturidade, utilizando tecnologias e algoritmos específicos de cada fabricante.

Esse parâmetro acrescenta informações sobre a atividade eritropoiética, mas apresenta um importante problema analítico: os resultados de IRF produzidos por diferentes equipamentos ainda não são suficientemente harmonizados.

Consequentemente, a interpretação da IRF exige atenção à metodologia empregada, especialmente quando resultados obtidos em equipamentos diferentes são comparados.

Conteúdo de hemoglobina dos reticulócitos (RHC)

O conteúdo de hemoglobina dos reticulócitos, denominado no estudo como Reticulocyte Hemoglobin Content (RHC), fornece uma medida relacionada à quantidade de hemoglobina presente nos reticulócitos.

Esse parâmetro acrescenta informações sobre a hemoglobinização dos eritrócitos jovens e representa um dos avanços proporcionados pela análise automatizada.

Mas, sua determinação não é uniforme entre os fabricantes. Diferentes sistemas utilizam tecnologias e cálculos próprios, além de nomenclaturas específicas.

Entre as denominações apresentadas no artigo, destacam-se:

Embora esses parâmetros estejam relacionados ao conteúdo de hemoglobina dos reticulócitos, não se deve assumir que seus valores são diretamente intercambiáveis entre diferentes sistemas analíticos.

No estudo, o RHC apresentou concordância intermediária entre a contagem percentual de reticulócitos e a IRF.

Resultados do estudo

Para investigar a comparabilidade dos resultados, os pesquisadores analisaram 855 amostras de pacientes, provenientes de seis instituições, utilizando nove modelos distintos de analisadores hematológicos.

Foram realizadas 15 comparações entre sistemas analíticos, com avaliação de três parâmetros: RET%, IRF e RHC.

Os resultados demonstraram diferenças importantes na comparabilidade e na precisão dos parâmetros.

Imprecisão analítica

A imprecisão foi avaliada por meio dos coeficientes de variação (CV) obtidos a partir de medições repetidas das amostras.    

O conteúdo de hemoglobina dos reticulócitos apresentou a menor imprecisão, enquanto a IRF demonstrou a maior variabilidade entre as medições.

Esses resultados mostram que a incorporação de novos parâmetros ao laudo hematológico deve considerar não apenas sua utilidade clínica, mas também seu desempenho analítico.

Desafios

Um dos principais problemas identificados pelos pesquisadores é a ausência de materiais de referência com comutabilidade adequada para os diferentes sistemas analíticos.

A comutabilidade é a propriedade que permite que um material utilizado na avaliação laboratorial apresente comportamento comparável ao das amostras de pacientes quando analisado por diferentes métodos.

No caso dos reticulócitos, essa padronização é dificultada pela instabilidade das amostras, principalmente dos parâmetros relacionados à detecção de RNA residual.

Além disso, os fabricantes utilizam diferentes reagentes, tecnologias de detecção e algoritmos para calcular os parâmetros derivados.

Aplicação no laboratório clínico

A principal implicação é que a disponibilidade de um parâmetro no analisador hematológico não garante que seus resultados possam ser comparados diretamente aos de outros equipamentos.

A contagem percentual de reticulócitos apresentou melhor concordância entre os sistemas avaliados, enquanto a IRF demonstrou diferenças mais expressivas.

O conteúdo de hemoglobina dos reticulócitos, embora tenha apresentado boa precisão nas medições repetidas, também apresentou diferenças metodológicas relevantes.

Então, se seu laboratório for incorporar esses parâmetros da automação no laudo, é importante que esteja explícito qual o analisador e metodologia foi utilizada.

Se você já faz contagem de reticulócitos manualmente, sabe que a automação transformou a análise de reticulócitos, permitindo que o laboratório clínico obtenha informações mais detalhadas sobre os eritrócitos jovens.

A padronização desses "novos" parâmetros ainda é um desafio importante para a hematologia laboratorial.

Referências

OBSTFELD, Amrom E. et al. Report of the International Council for Standardization in Haematology working group for standardization of reticulocyte parameters. International Journal of Laboratory Hematology, v. 46, n. 2, p. 266-274, 2024. DOI: https://doi.org/10.1111/ijlh.14209.

CELLWIKI. RET - Normal. CellWiki: Hematology, [s. d.]. Disponível em: https://www.cellwiki.net/en/scatters/ret-normal. Acesso em: 20 out. 2026.

O diagnóstico laboratorial da sífilis continua sendo um desafio, mesmo após décadas de uso consolidado de testes sorológicos. 

Infelizmente, não existe um único exame seja capaz de identificar todos os casos com alta sensibilidade em todas as fases da doença.

Por isso, a estratégia diagnóstica ainda depende da combinação de testes treponêmicos e não treponêmicos, juntos ao contexto clínico e epidemiológico.

A principal mudança observada nos últimos anos não foi a substituição da sorologia, mas sua automação, reorganização em novos algoritmos e integração com métodos rápidos e moleculares. 

A sorologia permanece como base do diagnóstico da sífilis, enquanto novas tecnologias atuarão principalmente como ferramentas complementares.

Sorologia para sífilis

Os testes sorológicos permanecem como principal estratégia diagnóstica para praticamente todos os estágios da sífilis. 

Eles são divididos em dois grandes grupos:

• Testes treponêmicos, que detectam anticorpos contra antígenos de T. pallidum
• Testes não treponêmicos, que detectam anticorpos contra antígenos lipoidais associados à infecção e à lesão tecidual

Entre os antígenos empregados nos testes treponêmicos estão as lipoproteínas TpN15, TpN17 e TpN47. 

Os anticorpos IgM treponêmicos podem surgir cerca de 2 semanas após a infecção, enquanto os anticorpos IgG aparecem posteriormente e geralmente permanecem detectáveis por longos períodos, frequentemente por toda a vida.

Por isso, um teste treponêmico positivo não diferencia infecção ativa de infecção previamente tratada.

Então, os testes não treponêmicos continuam sendo essenciais para avaliação de atividade da doença e monitoramento terapêutico.

Titulação de VDRL

O título do teste não treponêmico deve ser sempre informado.

O resultado quantitativo dos testes não treponêmicos é essencial para o acompanhamento da resposta terapêutica.

Após tratamento adequado, espera-se geralmente uma redução de pelo menos quatro vezes no título, equivalente a duas diluições, ao longo do acompanhamento. 

Uma elevação sustentada de quatro vezes pode indicar reinfecção, falha terapêutica ou tratamento inadequado.

Por isso, um resultado como apenas “VDRL reagente” fornece informação incompleta.

O laboratório deve informar o título final, por exemplo:

• VDRL: reagente
• Título: 1:32

O fenômeno de prozona

Nos testes não treponêmicos, concentrações muito elevadas de anticorpos podem impedir a formação adequada da rede de floculação e gerar um resultado falsamente negativo.

Esse fenômeno é conhecido como prozona.

Aproximadamente 1% das amostras podem apresentar esse efeito em determinadas situações, especialmente em sífilis primária e secundária com títulos muito elevados. 

A diluição da amostra pode resolver o problema.

Isso significa que um resultado não reagente não deve ser interpretado isoladamente quando existe forte suspeita clínica.

Algoritmo clássico e reverso

A investigação sorológica pode seguir dois modelos principais.

No algoritmo clássico (Fluxograma 1), o laboratório inicia com um teste não treponêmico, geralmente VDRL. 

As amostras reagentes são então avaliadas por um teste treponêmico confirmatório.

Não treponêmico → Treponêmico

Esse modelo é eficiente para identificar doença ativa, mas possui menor sensibilidade nas fases muito iniciais e tardias.

Com a expansão dos imunoensaios automatizados, muitos laboratórios passaram a utilizar o algoritmo reverso (Fluxograma 2):

Treponêmico automatizado → Não treponêmico → Treponêmico diferente, em caso de discordância

Os testes treponêmicos automatizados permitem grande volume de processamento e excelente desempenho analítico.

Novos desafios da automação

Quando o teste treponêmico inicial é reagente e o VRDL é não reagente, o resultado precisa ser esclarecido com outro teste treponêmico baseado em metodologia ou antígenos diferentes.

Esse cenário pode representar:

• infecção previamente tratada
• sífilis muito recente
• sífilis latente
• um resultado treponêmico falso-positivo

Por isso, a automação resolveu parte do problema de produtividade, mas aumentou a necessidade de interpretação integrada e algoritmos bem definidos.

RPR automatizado

Um dos avanços mais relevantes para o laboratório clínico é a disponibilidade de plataformas capazes de realizar RPR (Rapid Plasma Reagin) quantitativo automatizado.

Esses sistemas podem:

• reduzir o tempo de resposta
• diminuir trabalho manual
• aumentar a capacidade de processamento
• reduzir parte da subjetividade da leitura visual da floculação

Testes rápidos

Os testes point-of-care, ou POC, representam outro avanço importante.

Atualmente existem testes imunocromatográficos capazes de detectar anticorpos treponêmicos utilizando sangue total obtido por punção digital, sangue venoso, soro ou plasma.

A principal vantagem não é necessariamente maior sensibilidade, mas a possibilidade de fornecer resultado em poucos minutos e permitir diagnóstico e tratamento na mesma oportunidade de atendimento.

Isso pode ser especialmente relevante em:

• Gestantes
• Populações com dificuldade de acesso ao sistema de saúde
• Pessoas em situação de rua
• Locais onde existe alto risco de perda de seguimento

Em um estudo, pacientes que fizeram teste rápido receberam tratamento em mediana de 1 dia, enquanto aqueles submetidos ao fluxo laboratorial tradicional receberam tratamento em mediana de 9 dias.

Detecção direta do Treponema pallidum

Os métodos de detecção direta procuram pelo próprio microrganismo ou seu material genético.

Historicamente, a microscopia de campo escuro foi considerada uma importante ferramenta para avaliação das lesões da sífilis primária.

Mas, seu uso na prática diminuiu muito nas últimas décadas.

Na anatomia patológica, a imunohistoquímica pode ser utilizada para identificação de T. pallidum, embora possa ocorrer reação cruzada com outras espiroquetas.

PCR para sífilis

Os testes de amplificação de ácidos nucleicos, NAAT, transformaram o diagnóstico de várias infecções sexualmente transmissíveis, mas da sífilis ainda não.

Várias tecnologias já foram estudadas:

• PCR convencional
• PCR em tempo real
• RT-PCR
• Amplificação mediada por transcrição (LAMP)
• Combinação de PCR com amplificação de sinal baseada em CRISPR

A principal limitação é a grande variação da sensibilidade conforme o estágio da doença, tipo de amostra, carga bacteriana e método de extração.

A concentração do T. pallidum varia conforme o estágio da doença e o local de coleta.

O tipo de amostra interfere muito na PCR.

Em swabs de lesões, a sensibilidade molecular fica em torno de 65% a 80%, enquanto amostras utilizadas para rastreamento apresentam desempenho inferior.

Neurossífilis

Na neurossífilis, o desempenho molecular permanece limitado devido à baixa carga de treponemas no líquor e ao pequeno volume disponível para extração.

Por isso, um PCR negativo no líquor não exclui neurossífilis.

O VDRL no líquor permanece importante. Um resultado reagente apoia fortemente o diagnóstico, embora sua ausência também não seja suficiente para descartar a doença.

Sífilis congênita

Na sífilis congênita, PCR e outros NAATs vêm sendo avaliados em líquido amniótico, placenta, cordão umbilical e tecidos, mas os resultados são muito heterogêneos.

Na prática, a comparação dos títulos não treponêmicos materno e neonatal continua importante.

Um título neonatal pelo menos quatro vezes maior que o materno é altamente sugestivo de sífilis congênita. 

Idealmente, as amostras devem ser analisadas simultaneamente e no mesmo laboratório.

O futuro do diagnóstico da sífilis

O cenário não sugere que PCR ou outras novas tecnologias substituirão rapidamente os testes sorológicos.

Pelo contrário, a tendência é uma evolução baseada na combinação de:

• Sorologia automatizada
• Testes rápidos
• Métodos moleculares complementares
• Integração dos históricos laboratoriais

Outro objetivo importante será a harmonização dos títulos não treponêmicos.

O que muda para o laboratório clínico?

Para o biomédico, talvez o principal avanço não esteja em um único “novo exame”, mas na transformação do processo diagnóstico.

A tendência é sair de um modelo predominantemente manual e fragmentado para um sistema mais automatizado, rápido e integrado.

Referência

Brasil. Ministério da Saúde. Manual Técnico para Diagnóstico da Sífilis. Brasília - Ministério da Saúde, 2021.

TREGER, Rebecca S.; MENZA, Tim W.; TRUONG, Thao T.; LIEBERMAN, Joshua A. Advances in syphilis diagnostics to address the 21st-century epidemic. Clinical Chemistry, v. 71, n. 9, p. 935-948, 2025. DOI: 10.1093/clinchem/hvaf072.

A clonalidade dos linfócitos indica se uma população linfocitária se originou de múltiplos clones diferentes ou da expansão predominante de um único clone.

Linfócitos policlonais

Em processos reativos, como infecções e estímulos imunológicos, ocorre geralmente uma expansão policlonal. 

Isso significa que vários clones de linfócitos são ativados ao mesmo tempo, cada um com receptores diferentes. 

É uma resposta fisiológica e heterogênea do sistema imune.

Linfócitos monoclonais

Nas neoplasias linfoproliferativas, como a LLC, ocorre expansão clonal ou monoclonal. 

Nesse caso, grande parte das células deriva de um mesmo clone e compartilha características imunofenotípicas semelhantes. 

Nos linfócitos B, essa clonalidade pode ser demonstrada pela restrição de cadeia leve, com predomínio de kappa ou lambda, em vez da distribuição mista esperada em uma população policlonal.

Como avaliar a clonalidade no laboratório

No laboratório, a clonalidade linfocitária é avaliada principalmente pela imunofenotipagem por citometria de fluxo. Nos linfócitos B, verifica-se a expressão das cadeias leves das imunoglobulinas, kappa (κ) e lambda (λ).

Em uma população policlonal, como ocorre habitualmente em respostas reacionais, encontram-se células expressando tanto kappa quanto lambda, mantendo uma distribuição relativamente heterogênea. 

Já em uma população clonal, observa-se restrição de cadeia leve, ou seja, predomínio marcante de kappa ou de lambda, indicando que grande parte das células deriva do mesmo clone.

A avaliação não deve se limitar à relação kappa/lambda. 

É necessário analisar conjuntamente o padrão de expressão dos demais marcadores e procurar uma população celular com fenótipo anormal e uniforme. 

Na LLC, por exemplo, a demonstração de uma população B clonal costuma ser feita pela associação entre restrição de cadeia leve e o imunofenótipo característico, como CD19+, CD5+, CD23+ e CD200+, com expressão geralmente fraca de CD20 e imunoglobulina de superfície.

Em resumo

Policlonalidade sugere resposta reacional.

Monoclonalidade sugere expansão clonal e levanta a possibilidade de neoplasia.

Em ambos os casos, sempre deve-se interpretar os resultados junto com morfologia, imunofenótipo e contexto clínico.

Este post traz as atualizações mais recentes sobre a LLC. Confira!

Definição

A leucemia linfocítica crônica (LLC) é uma neoplasia de células B maduras, caracterizada pela proliferação e acúmulo de linfócitos B clonais, principalmente no sangue periférico, medula óssea, linfonodos e baço. 

Na classificação atual, a LLC integra o grupo das neoplasias de células B maduras e faz parte do mesmo espectro biológico que:

• Linfocitose B monoclonal (MBL)
• Linfoma linfocítico de pequenas células (SLL)

Do ponto de vista laboratorial, para caracterizar a LLC é necessário encontrar no hemograma no mínimo 5.000 linfócitos/µL.

É importante que seja uma linfocitose persistente por pelo menos 3 meses, para descartar aumento reacional (em infecções, por exemplo).

A clonalidade dos linfócitos deve ser avaliada por meio da imunofenotipagem por citometria de fluxo.

• Leia também: Como identificar linfócitos atípicos

Etiologia e patogênese

A etiologia da LLC permanece desconhecida. 

Pode haver uma provável participação de fatores genéticos e ambientais, visto que há maior frequência da doença entre familiares de pacientes com LLC e sua distribuição diferente entre populações. 

Cerca de 5% a 10% dos pacientes apresentam histórico familiar, reforçando a contribuição genética.

Do ponto de vista biológico, a doença resulta do acúmulo progressivo de um clone de células B.

Alterações genômicas interferem principalmente nos mecanismos de:

• Proliferação
• Apoptose
• Resposta ao dano do DNA
• Sinalização celular

Ou seja, os linfócitos doentes se proliferam e não "morrem".

Cerca de 80% dos pacientes apresentam pelo menos uma das alterações cromossômicas mais comuns: 

• del(13q)
• del(11q)
• del(17p)
• trissomia 12

Entre elas, a del(13q) é a alteração cromossômica mais frequente. 

Já a del(17p) envolve a região onde se encontra o gene TP53, cuja alteração apresenta grande importância prognóstica e terapêutica.

Diagnóstico laboratorial da LLC

Os três pilares são:

1. Hemograma
2. Morfologia do sangue periférico
3. Imunofenotipagem

Hemograma

A alteração clássica é a linfocitose absoluta persistente.

Ou seja, mais de 5.000 linfócitos/µL no sangue periférico por pelo menos 3 meses.

O paciente pode ter associado também anemia e/ou trombocitopenia.

Entre 15 e 30% dos pacientes apresentam citopenias que podem estar relacionadas a infiltração dos linfócitos na medula óssea ou a reações autoimunes, como a anemia hemolítica autoimune.

O hemograma serve para triagem e acompanhamento da persistência da linfocitose, visto que é um exame mais barato e de simples execução.

Porém, não dá para usar somente o hemograma pois é necessário demonstrar que existe uma população B clonal.

Avaliação da morfologia em sangue periférico

A avaliação morfológica deve fazer parte da investigação.

Como são os linfócitos da LLC?

Tipicamente são:

• Pequenos
• Maduros
• Com pouco citoplasma
• Núcleo denso
• Cromatina parcialmente condensada
• Nucléolos não evidentes

Podem coexistir células maiores, formas atípicas e prolinfócitos.

Sombras (manchas) de Gumprecht

As sombras nucleares de Gumprecht, ou smudge cells, representam restos celulares formados principalmente pela fragilidade dos linfócitos doentes durante a preparação do esfregaço.

São um achado morfológico característico e frequente da LLC, mas não estabelecem o diagnóstico isoladamente.

Imunofenotipagem por citometria de fluxo

Este é o exame decisivo para confirmar a natureza clonal da população B.

O perfil clássico da LLC apresenta coexpressão de:

• CD19+
• CD5+
• CD23+

Vale destacar também expressão de CD20 e CD79b geralmente fraca, imunoglobulina de superfície reduzida e restrição para uma das cadeias leves, kappa ou lambda, demonstrando a natureza clonal da população.

Para investigação diagnóstica recomenda-se usar os seguintes marcadores:

• CD19
• CD20
• CD5
• CD23
• CD200
• CD79b
• kappa e lambda

Marcadores adicionais podem ser incorporados em situações duvidosas ou limítrofes, como:

• CD43
• CD81
• ROR1
• CD10
• CD200

É LLC, MBL ou SLL?

Essa diferenciação é essencial para quem trabalha no laboratório.

LLC

Mais de 5.000 linfócitos/µL no sangue periférico por ≥ 3 meses, com fenótipo característico.

MBL

Quando existe população B clonal com fenótipo semelhante à LLC, mas a contagem fica abaixo de 5.000 linfócitos/µL, na ausência de linfadenopatia, organomegalia, citopenias relacionadas à doença ou sintomas, o quadro corresponde à linfocitose B monoclonal.

O consenso brasileiro subdivide ainda:

• MBL de baixa contagem: < 500 linfócitos/µL
• MBL de alta contagem: > 500 linfócitos/µL, mas abaixo do critério para LLC

SLL

O linfoma linfocítico de pequenas células pertence ao mesmo processo biológico da LLC, mas predomina nos linfonodos, com pouca ou nenhuma população leucêmica circulante.

É definido pela presença de linfadenopatia, ausência de citopenia provocada por infiltração medular e menos de 5.000 linfócitos/µL no sangue periférico. 

Nessa situação, o diagnóstico deve, sempre que possível, ser confirmado histologicamente em linfonodo.

Medula óssea é necessária para diagnosticar LLC?

Não rotineiramente.

A biópsia de medula óssea e imunofenotipagem do aspirado medular não são recomendadas para o diagnóstico rotineiro da LLC. 

Podem ser utilizadas em situações específicas, principalmente na investigação de citopenias ou quando existe dúvida diagnóstica.

LLC é, em regra, diagnosticada a partir do sangue periférico.

FISH, TP53 e IGHV não são exames para “confirmar LLC”

Testes genéticos podem ser feitos, como:

• del(17p) por FISH
• mutação de TP53
• estado mutacional de IGHV
• outras alterações citogenéticas

Eles têm importância fundamental principalmente para prognóstico e escolha terapêutica.

Mas, não são necessários para estabelecer o diagnóstico básico de uma LLC típica.

Resumo

Referências

HALLEK, Michael. Chronic Lymphocytic Leukemia: 2025 Update on the Epidemiology, Pathogenesis, Diagnosis, and Therapy. American Journal of Hematology, v. 100, n. 3, p. 450-480, 2025. DOI: 10.1002/ajh.27546.

CHIATTONE, Carlos Sérgio et al. Diagnosis and treatment of chronic lymphocytic leukemia: 2025 recommendations of the Brazilian Group of Chronic Lymphocytic Leukemia of the Brazilian Association of Hematology and Hemotherapy (ABHH). Hematology, Transfusion and Cell Therapy, v. 47, n. 2, 103822, 2025. DOI: 10.1016/j.htct.2025.103822.

O que é rouleaux

O termo rouleaux vem do francês. 

Rouleau significa algo como “rolo” ou “cilindro”, e rouleaux é o plural.

Na hematologia, o nome foi adotado porque as hemácias agregadas assumem um aspecto semelhante a uma pilha de moedas ou a pequenos rolos, com as células alinhadas umas sobre as outras.

Por que rouleaux acontece

Esse arranjo ocorre quando diminui a repulsão elétrica entre as hemácias, especialmente por redução do efeito do potencial zeta.

Proteínas plasmáticas, principalmente fibrinogênio e imunoglobulinas, favorecem essa aproximação celular e a formação de rouleaux.

Algumas condições com aparecimento de rouleaux:

• Infecções
• Mieloma mútiplo
• Macroglobulinemia de Waldenström
• Câncer
• Doenças inflamatórias

Como identificar rouleaux

No microscópio vemos hemácias empilhadas (uma sobre a outra) formando uma espécie de fileira.

Seu aspecto é de um monte de moedas empilhadas.

Mas, atenção! Olhar na área certa da lâmina é importante.

Faça a análise na transição entre corpo e cauda da lâmina, onde as hemácias ficam (ou ficariam) espalhadas sem se sobreporem.

Se você olhar numa área muito espessa, mais para o meio do corpo ou cabeça da lâmina, vai parecer que todo paciente tem rouleaux.

É importante saber que a formação de rouleaux é reversível e as hemácias se dispersam ao se diluir a amostra com solução salina (0,9%).

Essa é uma das formas de ajudar a diferenciar o rouleaux de uma verdadeira aglutinação mediada por anticorpos.

Atlas de imagens

Referências

Ford, J. (2013), Red blood cell morphology. Int. Jnl. Lab. Hem., 35: 351-357. https://doi.org/10.1111/ijlh.12082

Este atlas de urinálise foi elaborado para auxiliar na identificação dos principais elementos encontrados no sedimento urinário, reunindo imagens e descrições objetivas de células, cilindros, microrganismos e outros achados microscópicos. 

O objetivo é facilitar a correlação entre morfologia, identificação laboratorial e significado clínico, servindo como material de consulta rápida para estudantes e profissionais durante o estudo e a rotina da análise microscópica da urina.

Células Epiteliais

Células epiteliais escamosas

Nas mulheres, o epitélio escamoso está localizado na base da bexiga e na uretra. Nos homens, encontra-se na porção final da uretra e no prepúcio. Além disso, essas células revestem o interior da vagina e o períneo.

A presença de uma pequena quantidade de células escamosas na urina é considerada normal, pois essas células estão constantemente sendo renovadas e substituídas.

Grandes quantidades geralmente ocorrem quando a urina entra em contato com áreas próximas, como vagina, períneo ou prepúcio, durante a coleta. Nessa situação, o achado é considerado contaminação da amostra.

Células epiteliais transicionais, ou uroteliais

As células epiteliais transicionais revestem o trato urinário desde a pelve renal até a uretra nos homens e até a região do trígono vesical nas mulheres. Essas células geralmente apresentam formato arredondado ou oval.

Células isoladas podem ser encontradas na urina normal. Quantidades maiores podem estar associadas, entre outras situações, a infecções do trato urinário ou ao uso de cateter urinário.

Células epiteliais tubulares renais (RTECs)

As células epiteliais tubulares renais, ou RTECs, Renal Tubular Epithelial Cells, formam um epitélio em monocamada que reveste o túbulo proximal, a alça de Henle, o túbulo distal, os ductos coletores e a papila renal.

A presença dessas células na urina pode indicar lesão do trato urinário superior ou lesão tubular renal, podendo estar associada a condições como infecções, necrose tubular aguda ou rejeição de transplante renal, entre outras causas.

Hemácias

A morfologia das hemácias urinárias auxilia na investigação da origem da hematúria.

Na hematúria não glomerular, predominam eritrócitos isomórficos e monomórficos.

Já na hematúria glomerular, são mais comuns eritrócitos dismórficos e polimórficos, podendo haver cilindros eritrocitários.

Achados que reforçam origem glomerular incluem mais de 40% de eritrócitos dismórficos, mais de 5% de acantócitos, presença de cilindros eritrocitários, aumento da proteinúria ou albuminúria e sinais de redução da função renal.

A interpretação deve considerar coleta adequada, processamento rápido e padronização da análise.

Leucócitos

Os leucócitos encontrados na urina são, geralmente, granulócitos. 

Define-se leucocitúria como a presença de mais de 5 leucócitos por campo, em aumento de 400×.

Na maioria das vezes, a leucocitúria sugere infecção do trato urinário, especialmente quando há presença de bactérias e sintomas urinários.

Mas, granulócitos também podem ser encontrados em situações de inflamação estéril, como na glomerulonefrite.

Cristais

Leia o artigo:

• Principais cristais encontrados na urina

Cilindros

• Hialino: formado basicamente por uromodulina. Pode aparecer em pessoas saudáveis, especialmente após exercício, febre ou desidratação.
• Granuloso: contém grânulos derivados de proteínas e degeneração celular. Geralmente está associado a lesão renal.
• Hemático: contém hemácias e sugere fortemente sangramento de origem glomerular, como em glomerulonefrites.
• Leucocitário: contém leucócitos e indica inflamação renal, sendo comum em pielonefrite e nefrite intersticial.
• Céreo: homogêneo, refringente e de bordas bem definidas. Está relacionado a lesão renal avançada e doença renal crônica.

Bactérias

As bactérias na urina podem apresentar formato alongado, como bacilos, ou arredondado, como cocos. Uma diferenciação mais precisa apenas pela análise do sedimento urinário geralmente não é possível.

Esses microrganismos podem estar imóveis ou apresentar pequenos movimentos, semelhantes ao movimento browniano.

A presença de bactérias frequentemente ocorre acompanhada de leucócitos, caracterizando piúria.

A presença de mais de 20 bactérias por campo, em aumento de 400×, é descrita como bacteriúria.

A causa mais comum é a infecção do trato urinário.

Leveduras

Leveduras são fungos, frequentemente representados em humanos por espécies do gênero Candida, como Candida albicans. 

Esses microrganismos podem estar presentes em pequenas quantidades no organismo, mas podem proliferar excessivamente quando ocorre desequilíbrio da microbiota, como após uso de antibióticos, em pessoas com imunidade reduzida ou com diabetes.

Ao microscópio, as leveduras costumam ser reconhecidas por células arredondadas ou ovais, frequentemente com brotamento, além da possível presença de hifas ou pseudohifas, que aparecem como estruturas filamentosas.

As células podem ocorrer isoladamente ou em agrupamentos, dependendo do tipo e da intensidade da infecção.

A diferenciação precisa da espécie de levedura apenas pela análise do sedimento urinário geralmente não é possível.

Muco

O muco é uma substância produzida pelo epitélio da bexiga e da uretra que, entre outras funções, ajuda na eliminação de bactérias.

A presença de uma pequena quantidade de muco na urina é considerada normal.

Quantidades aumentadas podem estar associadas, por exemplo, a infecção da bexiga.

Ao microscópio, o muco pode se assemelhar a um cilindro hialino.

Espermatozoides

Quando espermatozoides são encontrados na urina de homens, geralmente indicam ejaculação recente, embora também possam estar relacionados à ejaculação retrógrada.

Em mulheres, a presença de espermatozoides na urina é considerada uma forma de contaminação da amostra. Dependendo da idade da paciente, esse achado pode ter relevância clínica.

Em muitos laboratórios, existe uma política específica para relatar ou não a presença de espermatozoides no exame de urina.

Referências

CELLWIKI. Urine. Disponível em: CellWiki – Urine. Acesso em: 3 out. 2026.

O isolamento das bactérias é feito por meio do cultivo em meios apropriados, que fornecem os nutrientes necessários para o crescimento. 

Esses meios podem ser mais simples, usados para o crescimento de diferentes tipos de bactérias, ou enriquecidos com componentes como sangue e soro, que ajudam no desenvolvimento de microrganismos mais exigentes.

Também existem os meios seletivos, que favorecem o crescimento de alguns microrganismos e dificultam o de outros. 

Já os meios diferenciais permitem observar características específicas das bactérias, como mudanças de cor no meio ou diferentes tipos de hemólise.

Alguns meios conseguem ser seletivos e diferenciais ao mesmo tempo, como o MacConkey e o EMB. 

Por isso, observar o crescimento, a cor, a morfologia das colônias e as alterações no meio é uma etapa importante na identificação presuntiva das bactérias.

Meios de cultura mais comuns utilizados na microbiologia laboratorial

Ágar TSA (Tryptic Soy Agar)

Classificação: meio nutritivo, de uso geral e não seletivo.

O que favorece: crescimento de uma ampla variedade de bactérias não fastidiosas e de diversos outros microrganismos.

Princípio: contém peptonas derivadas de caseína e soja, que fornecem nitrogênio, aminoácidos e peptídeos necessários ao crescimento microbiano. Também apresenta componentes que fornecem energia e mantêm o equilíbrio osmótico. Pode servir como base para meios enriquecidos, como o TSA acrescido de sangue.

Exemplos típicos:

• Escherichia coli: bom crescimento
• Staphylococcus aureus: bom crescimento
• Pseudomonas aeruginosa: bom crescimento
• Bacillus spp.: bom crescimento

Importante: o TSA não foi desenvolvido para diferenciar espécies bacterianas. A morfologia colonial pode fornecer informações preliminares, mas outros testes são necessários para a identificação.

Ágar sangue

Classificação: enriquecido e diferencial.

O que favorece: crescimento de uma ampla variedade de bactérias, inclusive muitos microrganismos com maiores exigências nutricionais.

Princípio: uma base nutritiva é enriquecida com sangue, frequentemente sangue de carneiro desfibrinado. Além de favorecer o crescimento, as hemácias permitem observar a capacidade dos microrganismos de produzir hemólise.

Como interpretar:

Alfa hemólise: lise parcial das hemácias, produzindo uma região esverdeada ou acastanhada ao redor das colônias.

Beta hemólise: lise completa das hemácias, produzindo uma zona clara e transparente ao redor das colônias.

Ausência de hemólise: não ocorre alteração perceptível das hemácias ao redor da colônia. Tradicionalmente esse padrão também é chamado de Gama hemólise, embora não corresponda propriamente a uma hemólise.

Exemplos típicos:

• Streptococcus pyogenes: beta-hemólise
• Streptococcus pneumoniae: alfa-hemólise
• Estreptococos do grupo viridans: geralmente alfa-hemólise
• Enterococcus faecalis: frequentemente ausência de hemólise
• Staphylococcus aureus: algumas cepas apresentam beta-hemólise

Importante: o padrão de hemólise é uma característica importante para a identificação presuntiva, principalmente de estreptococos, mas não deve ser utilizado isoladamente para identificar uma espécie.

Ágar chocolate

Classificação: meio enriquecido e não seletivo, quando não possui antimicrobianos adicionados.

O que favorece: principalmente o crescimento de bactérias fastidiosas, ou seja, microrganismos com maiores exigências nutricionais.

Princípio: durante o preparo, o aquecimento provoca lise das hemácias e liberação de nutrientes intracelulares. Entre eles estão a hemina, conhecida como fator X, e o NAD, fator V, importantes para o crescimento de determinadas bactérias fastidiosas.

Como interpretar:

O crescimento deve ser avaliado principalmente pela presença, quantidade e morfologia das colônias.

Diferentemente do ágar sangue, o ágar chocolate não é utilizado rotineiramente para avaliar padrões de hemólise, pois as hemácias já foram lisadas durante sua preparação.

Exemplos típicos:

• Haemophilus influenzae: crescimento
• Neisseria gonorrhoeae: crescimento
• Neisseria meningitidis: crescimento

Importante: apesar do nome, o meio não contém chocolate. A coloração marrom é produzida pelo aquecimento do sangue e pela lise das hemácias. Formulações seletivas de ágar chocolate podem conter antimicrobianos e apresentar finalidade diferente do ágar chocolate convencional.

Ágar MacConkey

Classificação: seletivo e diferencial.

O que seleciona: principalmente bacilos Gram-negativos, especialmente bactérias entéricas.

Princípio: os sais biliares e o cristal violeta inibem grande parte das bactérias Gram-positivas. A presença de lactose e do indicador vermelho neutro permite diferenciar bactérias fermentadoras de lactose das não fermentadoras.

Como interpretar:

Lactose positiva: colônias rosadas ou avermelhadas.

Lactose negativa: colônias incolores, claras ou pálidas.

Alguns fermentadores intensos podem apresentar precipitação de sais biliares ao redor das colônias.

Exemplos típicos:

• Escherichia coli: lactose positiva, geralmente colônias rosadas a avermelhadas
• Klebsiella pneumoniae: lactose positiva, frequentemente com aspecto mucoide
• Salmonella spp.: lactose negativa
• Shigella spp.: lactose negativa
• Pseudomonas aeruginosa: lactose negativa

Importante: A coloração da colônia fornece identificação presuntiva, não identificação definitiva.

Ágar EMB (Eosin-methylene Blue)

Classificação: diferencial, com efeito seletivo sobre parte da microbiota Gram-positiva.

O que seleciona: favorece principalmente o crescimento de bactérias Gram-negativas entéricas, enquanto os corantes eosina e azul de metileno dificultam o crescimento de muitas bactérias Gram-positivas.

Princípio: a fermentação da lactose provoca produção de ácidos e redução do pH. A acidificação modifica a interação das colônias com os corantes do meio, produzindo diferentes padrões de coloração.

Como interpretar:

Fermentação intensa da lactose: colônias escuras, podendo apresentar brilho metálico.

Fermentação da lactose: colônias roxas ou escuras.

Não fermentação: colônias geralmente incolores ou pouco pigmentadas.

Exemplos típicos:

• Escherichia coli: frequentemente apresenta colônias escuras com brilho metálico esverdeado
• Enterobacter spp.: fermentador de lactose, geralmente com colônias rosadas a arroxeadas
• Klebsiella spp.: fermentador de lactose
• Salmonella spp.: lactose negativa
• Shigella spp.: lactose negativa

Importante: o brilho metálico esverdeado é bastante característico de muitas cepas de E. coli, mas não deve ser utilizado isoladamente para estabelecer a identificação da espécie.

Ágar Sal Manitol

Classificação: seletivo e diferencial.

O que seleciona: principalmente bactérias tolerantes a altas concentrações de sal, com destaque para os estafilococos.

Princípio: contém aproximadamente 7,5% de cloreto de sódio, concentração capaz de inibir o crescimento de muitas bactérias. O manitol funciona como carboidrato fermentável e o vermelho de fenol como indicador de pH. Quando ocorre fermentação do manitol, há produção de ácidos e o meio passa de vermelho ou rosado para amarelo.

Como interpretar:

Manitol positivo: crescimento acompanhado de coloração amarela do meio ao redor das colônias.

Manitol negativo: ocorre crescimento, mas o meio permanece rosado ou avermelhado.

Ausência de crescimento: microrganismo provavelmente não tolerou a elevada concentração de NaCl nas condições utilizadas.

Exemplos típicos:

• Staphylococcus aureus: geralmente manitol positivo, com colônias e halo amarelos
• Staphylococcus epidermidis: geralmente manitol negativo, sem amarelecimento do meio

Importante: crescimento associado à fermentação do manitol pode sugerir S. aureus, mas o resultado deve ser considerado presuntivo. A identificação deve ser confirmada por outros métodos.

Ágar CLED

Classificação: meio diferencial, não seletivo e deficiente em eletrólitos.

O que favorece: o crescimento dos principais microrganismos associados às infecções do trato urinário, sendo especialmente utilizado em uroculturas.

Princípio: o CLED, sigla para Cystine Lactose Electrolyte Deficient, contém lactose como carboidrato fermentável e azul de bromotimol como indicador de pH. A fermentação da lactose produz ácidos e modifica a cor do meio. A L-cistina favorece o crescimento de alguns coliformes dependentes desse aminoácido. A baixa concentração de eletrólitos restringe a disseminação característica de Proteus spp. pela superfície do ágar.

Como interpretar:

Fermentadores de lactose: produzem acidificação do meio, formando colônias e/ou região ao redor com tonalidade amarela.

Não fermentadores de lactose: geralmente apresentam colônias azuladas, azul-esverdeadas ou translúcidas, mantendo o meio com tonalidade verde ou azul.

Proteus spp.: consegue crescer, mas apresenta redução ou ausência do swarming ("véu") devido à deficiência de eletrólitos do meio.

Exemplos típicos:

• Escherichia coli: colônias amarelas, geralmente opacas
• Klebsiella spp.: fermentadoras de lactose, com colônias geralmente amarelas e frequentemente mucoides
• Proteus spp.: colônias translúcidas a azuladas, sem o espalhamento típico observado em outros meios
• Pseudomonas aeruginosa: não fermentadora de lactose, geralmente com colônias azul-esverdeadas
• Staphylococcus spp.: podem crescer e algumas espécies podem apresentar colônias amarelas.

Importante: o CLED é particularmente útil na bacteriologia urinária porque permite, na mesma placa, crescimento, contagem de colônias e diferenciação presuntiva dos microrganismos de acordo com a fermentação da lactose, além de controlar o swarming de Proteus. A aparência das colônias, entretanto, não deve ser utilizada isoladamente para identificação definitiva da espécie.

Ágar Hektoen

Classificação: seletivo e diferencial.

O que seleciona: principalmente enterobactérias, sendo especialmente utilizado para auxiliar no isolamento de Salmonella e Shigella em amostras entéricas.

Princípio: sais biliares e outros componentes reduzem o crescimento de grande parte das bactérias Gram-positivas e de parte da microbiota intestinal acompanhante. O meio contém lactose, sacarose e salicina para avaliação da fermentação de carboidratos. Tiossulfato e citrato férrico permitem detectar a produção de sulfeto de hidrogênio, H₂S.

Como interpretar:

Fermentadores dos carboidratos: colônias geralmente salmão, rosadas ou alaranjadas.

Não fermentadores: colônias verdes ou azul-esverdeadas.

H₂S positivo: formação de precipitado negro, geralmente observado no centro da colônia.

Exemplos típicos:

• Salmonella spp.: colônias azul-esverdeadas, frequentemente com centro negro
• Shigella spp.: colônias verdes, geralmente sem centro negro
• Escherichia coli: geralmente salmão a alaranjada
• Outros coliformes fermentadores: colônias salmão ou alaranjadas

Importante: no Hektoen não é adequado resumir a interpretação apenas como "fermentador ou não fermentador de lactose". O meio contém três carboidratos: lactose, sacarose e salicina, além do sistema para identificação de produção de H₂S.

Resumo em tabela

Referências

BRASIL. Agência Nacional de Vigilância Sanitária. Microbiologia clínica para o controle de infecção relacionada à assistência à saúde: módulo 5: tecnologias em serviços de saúde: descrição dos meios de cultura empregados nos exames microbiológicos. Brasília, DF: Anvisa, 2013. 95 p.

MICHIGAN STATE UNIVERSITY. Cultivation Media for Bacteria. Virtual Interactive Bacteriology Laboratory. East Lansing: Michigan State University, [s.d.]. Disponível em: https://learn.chm.msu.edu/vibl/content/differential/index.html. Acesso em: 1 out. 2026.