Pesquisa de bacilos álcool-ácido resistentes (BAAR)
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A pesquisa de micobactérias patogênicas (Mycobacterium tuberculosis e Mycobacterium leprae) por bacterioscopia direta é feita por meio do método de coloração de Ziehl-Neelsen.
O princípio desse método aproveita-se do fato de as micobactérias possuírem paredes celulares com alto teor de lipídeos (cerca de 60%, principalmente de ácido micólico).
Quando tratadas pelo corante fucsina fenicada, os bacilos coram-se de vermelho e persistem ao descoramento subsequente feito com uma solução de álcool-ácido forte (diferenciador).
É por isso que as micobactérias são conhecidas por serrem Bacilos Álcool-Ácido Resistentes (BAAR).
As outras bactérias, que não possuem suas paredes celulares ricas em lipídeos, perdem sua coloração pela fuscina após a adição da solução de álcool-ácido, ficando azul após a adição do azul de metileno (contra-corante).
Técnica da coloração de Ziehl-Neelsen
Reagentes:
- Corante primário: fucsina fenicada (carbolfucsina);
- Descolorante: álcool-ácido 3% (v/v);
- Contra-corante: azul de metileno ou verde malaquita.
- Cobrir a lâmina com fucsina fenicada;
- Aquecer a lâmina até à emissão de vapores (não deixar ferver ou secar);
- Deixe o corante aquecido na lâmina por 5 minutos;
- Lavar com água corrente;
- Cobrir a lâmina com álcool-ácido até descorar totalmente o esfregaço (2-5 min);
- Lavar com água corrente;
- Cobrir a lâmina com azul de metileno durante 1 a 2 minutos;
- Lavar com água corrente e limpar a parte inferior da lâmina;
- Esperar secar;
- Observar no microscópio em objetiva de imersão (100x).
Interpretação
- Organismos ácido-álcool resistentes: corados de vermelho.
- Não ácido-álcool resistentes: corados de azul/verde.
