Preparação e distribuição de meios de cultura
Por Brunno Câmara - sábado, fevereiro 12, 2011
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PREPARAÇÃO E DISTRIBUIÇÃO DE MEIOS DE CULTURA
- Os meios comerciais devem ser hidratados em pequena quantidade de água até que todo o meio
fique úmido e só depois deve-se acrescentar o restante da água. - Os meios preparados não comerciais, devem ser pesados separadamente em papel manteiga ou
papel alumínio e adicionados em um único frasco (normalmente em béquer), hidratar em pequena
quantidade de água até que todo o meio fique úmido e só depois deve-se acrescentar o restante
da água. - Sempre que for necessário levar o meio para fundir, usar vidro Pyrex, aquecer sobre a tela de
amianto ou similar e tripé, no bico de Bunsen. - Usar sempre luvas térmicas apropriadas para laboratório para manipular vidrarias quentes;
- Sempre que for usado o termo "esterilizar em autoclave", o tempo de esterilização é de 15
minutos e a temperatura de 121ºC. - Sempre que for usado o termo "esterilizar por filtração", usar o filtro com porosidade de 0,22
micra, recomendado para partículas bacterianas. - Quando distribuir o meio antes de autoclavar, os tubos não precisam estar esterilizados;
- Quando distribuir o meio após a autoclavação, os tubos, frascos, placas, pipetas e vidrarias ou
materiais auxiliares obrigatoriamente devem ser estéreis. - Os meios devem ser autoclavados com as tampas semi-abertas, para que a esterilização seja por
igual em todo o conteúdo dos tubos - tampas fechadas não permitem a entrada do vapor.
CONTROLE DE QUALIDADE DE ESTERILIDADE E CRESCIMENTO
- Para todos os meios confeccionados, colocar no mínimo 10% do lote preparado na estufa 35 ±
1°C por 24 horas para o controle de esterilizade. - Não deve haver mudança de cor nem crescimento de qualquer colônia.
- Para o controle de crescimento, sempre que possível usar cepas ATCC*, que são cepas de
referências de origem e padrão definido de provas para a sua caracterização. - Se não for possível o uso de cepas ATCC*, usar cepas 100% positivas para os controles de
qualidade de crescimento realizados.
*American Type Culture Collection
O ATCC é um centro de pesquisas privado, sem fins lucrativos, que tem como foco a aquisição, autenticação, produção, preservação, desenvolvimento e distribuição de amostras padrão de microrganismos, linhagens celulares e outros materiais para pesquisa.
Fonte: Anvisa