O que é e como usar uma citocentrífuga

Por Brunno Câmara - quarta-feira, março 04, 2020



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Uma citocentrífuga é uma centrífuga especial, utilizada com o objetivo de fazer lâminas de amostras que contenham células, como o líquido cefalorraquidiano e líquidos serosos.

Nessa centrífuga, as células são depositadas uniformemente em uma lâmina de vidro.
Uma mono camada de células é produzida numa área determinada da lâmina por meio da força centrífuga.

A citocentrífuga é útil em casos em que as amostras não possuem uma grande quantidade de células, ao contrário do sangue em que uma simples distensão na lâmina já é o suficiente para visualizarmos as células.

O requisito primário é que a amostra seja uma suspensão de células e que ela esteja fresca e as células intactas para serem avaliadas microscopicamente.

Equipamentos necessários

  • Citocentrífuga (Ex.: Cytospin™)
  • Lâminas de vidro
  • Papel filtro
  • Clipe para lâmina
  • Câmara para amostra
  • Pipetas

Contagem das células

É importante saber a quantidade de células presentes na amostra para um resultado satisfatório.

Se a suspensão de células estiver muito diluída, não haverá células o suficiente imobilizadas na lâmina após a centrifugação.

Se a suspensão de células estiver muito concentrada, as células tendem a se agruparem umas com as outras e não ficarão dispersas para uma boa visualização.

Aproximadamente 50.000 células na lâmina é uma boa quantidade.

Citocentrifugação

  1. Coloque a identificação na lâmina
  2. Monte o conjunto: clipe, lâmina, filtro e câmara
  3. Pipete o volume de amostra na câmara
  4. Centrifugue de acordo com o tipo de célula da sua amostra (Ex.: 450 RPM por 5 min)
  5. Remova a lâmina e espere secar
  6. Faça a coloração desejada


Vídeo



Resultado (Amostra de Liquor)

Seta: trofozoíto de Naegleria fowleri

Referência

Cheryl M. Koh. Chapter Sixteen - Preparation of Cells for Microscopy using Cytospin. Methods in Enzymology, 2013.

Brunno Câmara Autor

Brunno Câmara - Biomédico, CRBM-GO 5596, habilitado em patologia clínica e hematologia. Docente do Ensino Superior. Especialista em Hematologia e Hemoterapia pelo programa de Residência Multiprofissional do Hospital das Clínicas - UFG (HC-UFG). Mestre em Biologia da Relação Parasito-Hospedeiro (área de concentração: virologia). Coordenador e docente do curso de pós-graduação em Hematologia e Hemoterapia da AGD Cursos. Criador e administrador do blog Biomedicina Padrão. Criador e integrante do podcast Biomedcast.
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