O que é e como usar uma citocentrífuga
Por Brunno Câmara - quarta-feira, março 04, 2020
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Uma citocentrífuga é uma centrífuga especial, utilizada com o objetivo de fazer lâminas de amostras que contenham células, como o líquido cefalorraquidiano e líquidos serosos.
Nessa centrífuga, as células são depositadas uniformemente em uma lâmina de vidro.
Uma mono camada de células é produzida numa área determinada da lâmina por meio da força centrífuga.
A citocentrífuga é útil em casos em que as amostras não possuem uma grande quantidade de células, ao contrário do sangue em que uma simples distensão na lâmina já é o suficiente para visualizarmos as células.
O requisito primário é que a amostra seja uma suspensão de células e que ela esteja fresca e as células intactas para serem avaliadas microscopicamente.
Equipamentos necessários
- Citocentrífuga (Ex.: Cytospin™)
- Lâminas de vidro
- Papel filtro
- Clipe para lâmina
- Câmara para amostra
- Pipetas
Contagem das células
É importante saber a quantidade de células presentes na amostra para um resultado satisfatório.Se a suspensão de células estiver muito diluída, não haverá células o suficiente imobilizadas na lâmina após a centrifugação.
Se a suspensão de células estiver muito concentrada, as células tendem a se agruparem umas com as outras e não ficarão dispersas para uma boa visualização.
Aproximadamente 50.000 células na lâmina é uma boa quantidade.
Citocentrifugação
- Coloque a identificação na lâmina
- Monte o conjunto: clipe, lâmina, filtro e câmara
- Pipete o volume de amostra na câmara
- Centrifugue de acordo com o tipo de célula da sua amostra (Ex.: 450 RPM por 5 min)
- Remova a lâmina e espere secar
- Faça a coloração desejada
Vídeo
Resultado (Amostra de Liquor)
Seta: trofozoíto de Naegleria fowleri
Referência
Cheryl M. Koh. Chapter Sixteen - Preparation of Cells for Microscopy using Cytospin. Methods in Enzymology, 2013.
