Como interpretar um resultado de Citometria de Fluxo
Por Brunno Câmara
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No exemplo abaixo será utilizado um histograma de dois parâmetros.
Gráfico SSC x FSC
Após a amostra ser lida no equipamento, um gráfico será gerado.Cada ponto no gráfico é considerado um evento.
Teoricamente, cada evento corresponde a uma célula que passou pelo laser.
Mas, esses pontos também podem ser células mortas, restos celulares, bolhas, duas células juntas etc.
Seleção das células de interesse
É preciso selecionar (gate) os eventos que você quer analisar (elipse preta).
Para isso, é necessário conhecer as características relacionadas a tamanho e complexidade (grânulos) da célula que você está estudando.
Essa seleção é importante, pois nas análises posteriores você irá utilizar/visualizar somente os eventos que foram selecionados.
Ou seja, os restos celulares e outras células serão excluídos da análise.
Análise por quadrantes
Agora é a hora de visualizar quais células possuem ou não os marcadores que você está querendo pesquisar.
Por exemplo, CD41 marcado com o fluoróforo APC e CD33 marcado com o fluoróforo FITC.
Uma das estratégias de análise é separar as subpopulações de células em 4 quadrantes.
Veja no exemplo abaixo que a maioria das células HEL são positivas para CD41 e para CD33 (quadrante 2).
Resumindo
