Como interpretar um resultado de Citometria de Fluxo

Por Brunno Câmara - quinta-feira, maio 21, 2020



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No exemplo abaixo será utilizado um histograma de dois parâmetros.

Gráfico SSC x FSC

Após a amostra ser lida no equipamento, um gráfico será gerado.

Cada ponto no gráfico é considerado um evento.

Teoricamente, cada evento corresponde a uma célula que passou pelo laser.

Mas, esses pontos também podem ser células mortas, restos celulares, bolhas, duas células juntas etc.


Seleção das células de interesse

É preciso selecionar (gate) os eventos que você quer analisar (elipse preta). 

Para isso, é necessário conhecer as características relacionadas a tamanho e complexidade (grânulos) da célula que você está estudando.

Essa seleção é importante, pois nas análises posteriores você irá utilizar/visualizar somente os eventos que foram selecionados.

Ou seja, os restos celulares e outras células serão excluídos da análise.

Análise por quadrantes

Agora é a hora de visualizar quais células possuem ou não os marcadores que você está querendo pesquisar.

Por exemplo, CD41 marcado com o fluoróforo APC e CD33 marcado com o fluoróforo FITC.

Uma das estratégias de análise é separar as subpopulações de células em 4 quadrantes.


Veja no exemplo abaixo que a maioria das células HEL são positivas para CD41 e para CD33 (quadrante 2). 


Resumindo

Brunno Câmara Autor

Brunno Câmara - Biomédico, CRBM-GO 5596, habilitado em patologia clínica e hematologia. Docente do Ensino Superior. Especialista em Hematologia e Hemoterapia pelo programa de Residência Multiprofissional do Hospital das Clínicas - UFG (HC-UFG). Mestre em Biologia da Relação Parasito-Hospedeiro (área de concentração: virologia). Coordenador e docente do curso de pós-graduação em Hematologia e Hemoterapia da AGD Cursos. Criador e administrador do blog Biomedicina Padrão. Criador e integrante do podcast Biomedcast.
| Contato: @biomedicinapadrao |